Otimização do protocolo de extração de DNA da jabuticabeira

Resumo

A espécie híbrida Plinia sp. (jabuticaba) é abundante na Mata Atlântica. Devido a essa biodiversidade são necessários estudos voltados para a caracterização genética dessa espécie. Diante disso o objetivo do trabalho foi testar lavagens adicionais avaliando o residual contaminante no material genético a partir do protocolo padrão de extração de DNA de um kit comercial na espécie jabuticabeira. O experimento foi realizado na Universidade Tecnológica Federal do Paraná UTFPR Campus Dois Vizinhos no laboratório de Biologia. O DNA das folhas da jabuticabeira foi extraído com o kit Wizard® Genomic DNA Purification (PROMEGA) que foi modificado no processo de lavagem do material genético para avaliar a presença dos resíduos contaminantes. Com isso foram testadas três lavagens adicionais no DNA com etanol 70% nos seguintes tratamentos: 1-Lg (controle- protocolo do fabricante com apenas uma lavagem), 2-Lg (duas lavagens adicionais) e 3-Lg (três lavagens adicionais). Após finalizar o processo de extração, as amostras foram avaliadas quanto aos contaminantes por meio de eletroforese em gel de agarose 1% revelado por meio do transluminador UV. Os resultados obtidos nos tratamentos de lavagens no DNA da jabuticabeira foram ineficientes tanto no controle como para os demais tratamentos testados, pois a presença de banda genômica no gel de agarose 1% não foi evidenciada devido a presença dos resíduos na amostra. Conclui-se que, para se obter uma pureza livre de resíduos contaminantes no DNA da espécie híbrida Plinia sp. necessitaria mais lavagens adicionais com etanol 70% além da recomendada pelo fabricante do kit e as testadas neste estudo.